厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境如何形成

操作室厭氧環(huán)境形成

1. 按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室內放入二個無毒塑料袋；

2. 通電源開照明燈，開溫控儀，調節(jié)所需溫度及安全溫度；

3. 操作室內放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示劑（封閉）；

4. 關緊取樣室內外門，并抽真空校驗；

5. 操作室內次置換（氮氣置換）：

A. 先用橡皮管插入操作室內進氣口，另一頭插入塑料袋；

B. 接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥1，使二只塑料袋充足氮氣，關閉閥門1，然后扎緊袋口；

C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊；

D. 把塑料袋內氮氣漸漸放于操作室內，至全部放出。

6. 操作室第二次置換（氮氣置換）重復一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。

7. 操作室第三次置換（混合氣體置換）：（混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%）

A. 調換氣路打開混合氣閥3進氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關開閉排氣；

B. 混合氣充滿塑料袋后，關掉混合氣閥并打開閥5，使混合氣經過流量計，調整流量計，流量為每分鐘10ml左右；

C. 把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內；

D. 通過三次換氣后，操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

8. 操作室內打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變色情況，不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境；

9. 開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理，滅菌時間按具體實驗自定。